超微量分光光度計如何檢測蛋白A280

那么下面上海金鵬分析儀有限公司為大家簡單介紹一下關于超微量分光光度計如何檢測蛋白A280:

蛋白和核酸不一樣，具有很強的多樣性。Protein A280功能應用于檢測那些含有Trp、Tyr殘基或者含有Cys-Cys二硫鍵的純蛋白，這些蛋白在280nm吸光度明顯。本機方法不需要構(gòu)建標準曲線，而是檢測吸光度后，直接計算蛋白濃度。

Protein A280顯示紫外吸收光譜，檢測280nm處的吸光度后計算濃度（mg/ml）。和核酸檢測一樣，Protein A280記錄顯示的是10mm光程下的數(shù)據(jù)。

Nano-600在基座模式下可以*多檢測90mg/ml的BSA而不用稀釋。

當檢測樣品的吸光后的光強小于200時（10mm光程下），軟件會提示用戶選擇更小的測量光程，以保證測試的準確性。熒幕如下圖顯示。

決定液體表面張力的主要因素是溶液中水分子之間的氫鍵，通常情況下，水中的物質(zhì)，如蛋白、鹽離子、去污劑等都會通過破壞水分子之間的氫鍵來減小表面張力。雖然對于大部分樣品來說，1ul的量就足夠用于檢測了，但由于表面張力下降，我們建議使用2ul的量以保證形成液柱。

可選擇或取消基線校準。蛋白檢測默認的基線校準波長為340nm，用戶可根據(jù)試驗需要輸入不同的校準波長。在任何情況下，基線都自動設定為選擇波長下的吸光度，所有波長的吸光度讀數(shù)都是減去這個值的結(jié)果。

    注意：基線校準必須在進行樣品檢測之前設定，樣品檢測之后設定無效。不選擇基線校準，光譜值將會產(chǎn)生偏移，計算的濃度也會改變。

⑵操作步驟：

①設定項目名稱和樣品編號與蛋白類型；

②使用緩沖液建立空白對照：取2ul空白溶液加到下基座上，放下上基座并點擊“空白”；

③使用干凈無塵布把基座上的空白溶液擦干凈；

    ④取2ul樣品滴加到下基座上，放下上基座，點擊“樣品”進行檢測，檢測完成后界面如圖4.10；

    注意：每次檢測的樣品都必須是剛加入的。

⑤檢測完成后，必須用干凈的無塵布擦掉上下基座上的樣品，才可以檢測下一個樣品。

以上就是上海金鵬分析儀有限公司為大家整理總結(jié)關于超微量分光光度計如何檢測蛋白A280。

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