薄層色譜法(三)操作
更新時間:2022-04-06 點擊次數(shù):1392
那么下面上海金鵬分析儀器有限公司為大家簡單介紹一下關(guān)于薄層色譜法(三)操作:
薄層板
除另有規(guī)定外,將1份固定相和3份水在研缽中向一方向研磨混合,去除表面的氣泡后,倒入涂布器中,在玻板上平穩(wěn)地移動涂布器進行涂布(厚度為0.2~0.3mm),取下涂好薄層的玻板,置水平臺上于室溫下晾干,后在110℃烘30分鐘,即置有干燥劑的干燥箱中備用。使用前檢查其均勻度(可通過透射光和反射光檢視)。
手工制板一般分不含粘合劑的軟板和含粘合劑的硬板倆種。
常用吸附劑的基本情況:顆粒的大小,太大洗脫劑流速快分離效果不好,太細溶液流速太慢。一般說來吸附性強的顆粒稍大,吸附性弱的顆粒稍小。氧化鋁一般在100-150目。氧化鋁分為堿性氧化鋁,適用于碳氫化合物、生物堿及堿性化合物的分離,一般適用于PH為9-10的環(huán)境。中性氧化鋁適用于醛、酮、醌、酯等PH約為7.5的中性物質(zhì)的分離。酸性氧化鋁適用于PH4~4.5的酸性有機酸類的分離。氧化鋁、硅膠根據(jù)活性分為五個級,上等活性*高,五級*低。
黏合劑及添加劑:為了使固定相(吸附劑)牢固地附著在載板上以增加薄層的機械強度,有利于操作,需要時在吸附劑中加入合適的黏合劑:有時為了特殊的分離或檢出需要,要在固定相中加入某些添加劑。
薄層板的活化:硅膠板于105-110℃烘30分鐘,氧化鋁板于150-160℃烘4小時,可得活性的薄層板。
點樣
除另有規(guī)定外,用點樣器點樣于薄層板上,一般為圓點,點樣基線距底邊2.0cm,樣點直徑及點間距離同紙色譜法,點間距離可視斑點擴散情況以不影響檢出為宜。點樣時必須注意勿損傷薄層表面。
點樣直徑不超過5mm,點樣距離一般為1~1.5cm即可。
樣品在溶劑中的溶解度很大,原點將呈空心環(huán)--環(huán)形色譜效應(yīng)。因此配制樣品溶液時應(yīng)選擇對組分溶解度相對較小的溶劑。
點樣方式有點狀點樣和帶狀點樣。
以上就是上海金鵬分析儀器有限公司為大家整理總結(jié)關(guān)于薄層色譜法(三)操作。
我們上海金鵬分析儀器有限公司是專業(yè)生產(chǎn)超蛋白純化系統(tǒng)、超微量核酸蛋白測定儀、化學(xué)發(fā)光成像系統(tǒng)、凝膠成像分析系統(tǒng)、紫外分析儀、核酸蛋白檢測儀、紫外檢測儀、光化學(xué)反應(yīng)儀、旋渦混合器、恒流泵、自動部分收集器等為核心的十幾個產(chǎn)品系列的廠家,歡迎大家前來訂購