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液相色譜儀新技術:微柱液相色譜及輸液泵系統
更新時間:2016-03-21 點擊次數:1683

微柱液相色譜儀技術經歷了數十年的發(fā)展,從早期的使用不銹鋼管的微孔填充柱,發(fā)展到使用熔融硅膠毛細管的毛細管填充柱。進入20世紀80年代后期,隨著生命科學研究、臨床醫(yī)學研究、新型藥物研制、生物工程技術的發(fā)展、對產品質量控制和環(huán)境監(jiān)測指標的升級,提供了大量組成復雜樣品的分析任務。

為此必須提供具有分離能力和高靈敏度檢測能力的全新分析方法,并用于微量和痕量組分的分離和檢測。

納米(標度)液相色譜技術和超高壓液相色譜技術正是適應上述分析要求,先后于20世紀80年代末期和90年代初期先后提出。他們突破了常規(guī)液相色譜儀理論的約束,采用粒徑約為1.0μm的粒子填充色譜柱。在實驗裝置上采用當代的技術,用微流路處理器提供納升數量級微小、穩(wěn)定的流動相流量,用微芯片制作技術在硅晶片上蝕刻出納米尺寸的色譜柱管,制造了填充壓力高達410MPa(60000psi)的高壓輸液泵和耐壓1030MPa(150000psi)的高壓進樣閥,實現了前人從未實踐過的毛細管液相色譜分離技術。創(chuàng)建了理論塔板數高至20~40萬塊/m的高柱效,完成了組成復雜生物樣品的分離,還實現了與MS的聯用。從這些新技術的進展,可充分看到色譜工作者的創(chuàng)造能力。

用于微柱液相色譜儀分析的高壓輸液泵,其輸出流量應當準確,并有良好的重復性。由于輸出流量較小,早期曾使用氣動放大泵和螺桿注射泵,后經改造常規(guī)往復式柱塞泵,使其也可輸出低流量流動相。

現多采用小型螺桿注射泵和往復式柱塞泵。往復式柱塞泵由于螺桿注射泵,它具有對大的柱反壓的補償能力,快的流路平衡和穩(wěn)定性,并可用于梯度洗脫。由于液流的混合有一定的困難,在低流速下柱加壓是一個耗費時間的過程,若在梯度洗脫中使用螺桿注射泵,會明顯的增加梯度延遲。

當對微柱進行二元、三元、四元梯度洗脫時,使用低壓梯度仍是的方法,此時應使用精密時間比例電磁閥。此閥能準確控制每種溶劑的比例,確保不存在滲漏和粘結,使每種低流量溶劑在小體積混合器中*混合。當使用高壓梯度洗脫時也必須使用小體積的混合器,為保證高的混合效率,混合器也可使用一個很小的填充柱。對內徑1.0mm、長200~300mm的微柱,其柱體積約為100~150μL;對內徑0.5mm、長250mm的微柱,其柱體積已小至30μL。我們由此可知,微柱液相色譜儀梯度洗脫中所用混合器的體積要遠小于柱體積,并要具有很高的混合效率,這在儀器制作商的難度很大。當然,由于液相色譜儀廠家的技術和各方面服務是不盡相同的,要想儀器、使用壽命達到zui長,那么選擇一家比較專業(yè)的廠家是異常重要的。如果您有興趣,魯創(chuàng)分析儀器歡迎各界有志之士前來參觀指導!

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